Please use this identifier to cite or link to this item: https://repositorio.ufjf.br/jspui/handle/ufjf/11679
Files in This Item:
There are no files associated with this item.
Full metadata record
DC FieldValueLanguage
dc.contributor.advisor1Maranduba, Carlos Magno da Costa-
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/4763153859701731pt_BR
dc.contributor.advisor-co1Aguiar, Jair Adriano Kopke de-
dc.contributor.advisor-co1Latteshttp://lattes.cnpq.br/5023687526571878pt_BR
dc.contributor.referee1Paoli, Flávia de-
dc.contributor.referee1Latteshttp://lattes.cnpq.br/3840260579270155pt_BR
dc.contributor.referee2Nogueira , Breno Valentim-
dc.contributor.referee2Latteshttp://lattes.cnpq.br/pt_BR
dc.creatorLeal, Laís Lopardi-
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/7223029548923303pt_BR
dc.date.accessioned2020-09-10T12:07:34Z-
dc.date.available2020-09-10-
dc.date.available2020-09-10T12:07:34Z-
dc.date.issued2020-02-17-
dc.identifier.urihttps://repositorio.ufjf.br/jspui/handle/ufjf/11679-
dc.description.abstractThe increase in life expectancy and, consequently, the aging of the world population are accompanied by an increase in the number of joint diseases, such as osteoarthritis. Osteoarthritis is a degenerative disease of extracellular matrix components, with a palliative treatment strategy and without cure until now. In this scenario, tissue engineering becomes a potential area for the development of new osteoarthritis treatments, since its main purpose is to recover tissue in a degenerative process through the use of synthetic or biological biomaterials. For this reason, the present study aims to establish a decellularization protocol for later production of a biomaterial (hydrogel) derived from an extracellular matrix of cartilaginous tissue. Also, to evaluate the chondrogenic induction capacity of this matrix in conditioned medium. For this purpose, the hyaline cartilages of bovine tracheas were subjected to two different physical-chemical treatments to remove cellular content. Quantification of DNA content, biochemical and morphological analyzes were performed in order to assess the efficiency and quality of the developed protocol. For the evaluation of the induction of chondrogenic differentiation, morphologyical analysis and proliferation rate were performed. The first protocol was able to significantly remove the DNA content (approximately 62.5%) without altering the amount of glycosaminoglycans in the matrix. However, type II collagen showed alteration in its fibrillar suprastructure and significant reduction when exposed to the decalcifying agent for longer (approximately 65.2% and 55.9%). The second decellularization protocol was able to significantly remove the DNA content of chondrocytes (approximately 91.96%) without changing the amount of glycosaminoglycans and type II collagen in the cartilaginous matrix. However, type II collagen showed changes in its fibrillar suprastructure. The decellularized extracellular matrix was able to induce the differentiation of stem cells from human exfoliated deciduous teeth in culture observed by the morphological change (from spindle to spherical shape) and its proliferation increased when in the presence of lesser matrix. Therefore, the protocols developed for decellularization of bovine tracheal cartilage were able to reduce the DNA content without losing essential components of the extracellular matrix and with potential application in tissue engineering in the treatment of osteoarthritis. In addition, the matrix showed good biocompatibility with the stem cells under study, stimulating the differentiation of these stem cells to cells similar to chondrocytes, without commercial chemical inducers, needing further study to characterize this differentiation and its long-term proliferation.pt_BR
dc.description.resumoO aumento da expectativa de vida e, consequentemente, o envelhecimento da população mundial estão acompanhados do aumento no quadro de doenças articulares, como a osteoartrose. Osteoartrose é uma doença degenerativa dos componentes da matriz extracelular, com estratégia de tratamento paliativo e sem cura até o momento. Nesse cenário, a engenharia de tecidos torna-se uma potencial área para o desenvolvimento de novos tratamentos da osteoartrose, uma vez que sua principal finalidade é recuperar o tecido em processo degenerativo através do uso de biomateriais sintéticos ou biológicos. Por esse motivo, o presente estudo tem como objetivo estabelecer um protocolo de descelularização para posterior produção de um biomaterial (hidrogel) derivado de matriz extracelular de tecido cartilaginoso. Ainda, avaliar a capacidade de indução condrogênica dessa matriz em meio condicionado. Para isso, as cartilagens hialinas de traqueias bovinas foram submetidas a dois diferentes tratamentos físico-químicos para remoção de conteúdo celular. Quantificação do conteúdo de DNA, análises bioquímicas e morfológicas foram realizadas a fim de avaliar a eficiência e a qualidade dos protocolos desenvolvidos. Já para a avaliação da indução da diferenciação condrogênica foram feitas análise morfológica e taxa de proliferação. O primeiro protocolo foi capaz de remover significativamente o conteúdo de DNA (aproximadamente 62,5%) sem alterar a quantidade de glicosaminoglicanos da matriz. Contudo, o colágeno tipo II apresentou alteração em sua supraestrutura fibrilar e redução significativa quando exposto por mais tempo ao agente descalcificante (aproximadamente 65,2% e 55,9%). O segundo protocolo de descelularização foi capaz de remover significativamente o conteúdo de DNA dos condrócitos (aproximadamente 91,96%) sem alterar a quantidade de glicosaminoglicanos e de colágeno tipo II da matriz cartilaginosa. Ainda assim, o colágeno tipo II apresentou alteração na sua supraestrutura fibrilar. A matriz extracelular descelularizada foi capaz de induzir a diferenciação de células-tronco da polpa de dente decíduo humano em cultura observada pela alteração morfológica (de forma fusiforme para esférica), sendo sua proliferação aumentada quando na presença de menores quantidades de matriz. Diante disso, os protocolos desenvolvidos para descelularização de cartilagem de traqueia bovina foram capazes de reduzir o conteúdo de DNA sem a perda de componentes essenciais da matriz extracelular e com potencial aplicação na engenharia de tecidos no tratamento da osteoartrose. Além disso, a matriz mostrou boa biocompatibilidade com as células-tronco em estudo, estimulando a diferenciação destas células-tronco a células semelhantes à condrócitos, sem indutores químicos comerciais, necessitando aprofundar o estudo e a caracterização dessa diferenciação, bem como sua proliferação em longo prazo.pt_BR
dc.description.sponsorshipPROQUALI (UFJF)pt_BR
dc.languageporpt_BR
dc.publisherUniversidade Federal de Juiz de Fora (UFJF)pt_BR
dc.publisher.countryBrasilpt_BR
dc.publisher.departmentICB – Instituto de Ciências Biológicaspt_BR
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Ciências Biológicas: Imunologia e Doenças Infecto-Parasitárias/Genética e Biotecnologiapt_BR
dc.publisher.initialsUFJFpt_BR
dc.rightsAcesso Embargadopt_BR
dc.rightsAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/*
dc.subjectEngenharia de tecidospt_BR
dc.subjectCartilagempt_BR
dc.subjectMatriz extracelularpt_BR
dc.subjectCélulastroncopt_BR
dc.subjectHidrogelpt_BR
dc.subjectTissue engineeringpt_BR
dc.subjectCartilagept_BR
dc.subjectExtracellular matrixpt_BR
dc.subjectStem cellspt_BR
dc.subjectHydrogelpt_BR
dc.subject.cnpqCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICASpt_BR
dc.titleProdução de hidrogel para reconstrução de cartilagens com potencial aplicação em saúde humana e animalpt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR
Appears in Collections:Mestrado em Ciências Biológicas - Imunologia e Doenças Infecto - Parasitárias/Genética e Biotecnologia (Dissertações)



This item is licensed under a Creative Commons License Creative Commons